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腫瘤移植(TT)小鼠模型

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腫瘤移植(TT)小鼠模型

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物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:熒光素酶基因標(biāo)記的肝癌細(xì)胞(HepG2-luc)原位成瘤

模式動物品系SPF級Balb/c-nude 裸鼠,健康,雄性,5W,體重為18g~20g。

實驗分組:實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

實驗周期:4-6 weeks

建模方法:目前在肝癌研究中多采用異體移植法將腫瘤細(xì)胞株注射到動物皮下形成局部瘤塊來構(gòu)建移植瘤模型,相比機(jī)體原發(fā)性肝癌的形成及病理生理學(xué)變化仍有一定不同。通過向裸鼠肝臟注射肝癌細(xì)胞建立肝臟原位腫瘤模型,觀察其原位瘤成瘤的過程及狀態(tài),能較好的模擬人體肝癌生長過程,為進(jìn)一步抗肝癌免疫研究提供實驗動物模型。
1. 細(xì)胞株: 熒光素酶基因標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞株HepG2-luc。
2. 裸鼠肝臟原位成瘤模型的建立:
2.1 將標(biāo)準(zhǔn)條件下培養(yǎng)的處于對數(shù)生長期的HepG2-luc 細(xì)胞消化、離心,將所得的約 5×10 6 個細(xì)胞溶于 0.1 mL DMEM 培養(yǎng)液待用。
2.2 使用3%戊巴比妥鈉麻醉小鼠,待麻醉生效后,開腹暴露肝臟,用1ml胰島素注射針取準(zhǔn)備好的細(xì)胞注射于裸鼠肝臟內(nèi),用5-0絲線縫合傷口,活力碘消毒傷口,將裸鼠放在加熱墊上,待清醒后正常飲食飼養(yǎng)。
3. 熒光活體成像檢測:在成瘤后對裸鼠進(jìn)行生物發(fā)光活體成像檢測,成像前使用3%戊巴比妥鈉麻醉小鼠,再通過腹腔注射3mg底物 luciferin,底物注射后20~30分鐘后進(jìn)行生物發(fā)光活體成像檢測。

應(yīng)用:HepG2-luc原位成瘤可用于研究肝癌轉(zhuǎn)移的過程


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